福島県教育センター所報ふくしま　No.35（S53/1978.2） -009/026page

（1）ヒヨコの消化器官とその内容物のタンパク質の有無

《1》　準　備

○ヒヨコ，解剖用具，シャーレ，時計皿，麻酔びん， 脱脂綿，ガーゼ，駒込ピペット，乳鉢，乳棒，試験 管，電動式遠心分離機，0．9％生理食塩水，エチル エーテル，石英砂，ピューレツト試薬（CuSO4　15g O．2N　NaOHlOOml　ロッシュル塩4．5ｇ　ヨードカリ 0．5ｇ），30％NaOH

《2》　方　法

（ア）解剖のしかた

 　麻酔したヒヨコの腹面を上にして解剖皿にのせ，羽 毛をよく見水で濡らしたのち，肛門近くにはさみを入れ 腹部を切開し，胸骨を切断して内臓を露出させる

（イ）消化器官の取り出しかた

 　のどのところで食道を切断し，口腔から肛門に至る までの消化器官（肝臓・すい臓をつけたまま）を切断 しないように注意しながら取り出し，生理食塩水の入 ったシャーレ（直径9ｃｍ）に入れ，消化管を切らない ように腸間膜をはがし消化管を引き伸ばす。

　消化器官を，そのう，前胃，砂のう，小腸，盲腸， 直腸の各部分に切って，それぞれ小型シャーレ（直径 6ｃｍ）に移す，小腸を小腸前端部（十二指腸），小腸 中央部，小腸後端部に分け，さらに，十二指腸からす い臓をはがして，各々小型シャーレに移して生理食塩 水を入れておく

（ウ）試料の作りかた

 　各消化管の内容物を，それぞれ乳鉢に入れ，内容物 の容量の約2倍の蒸留水を加え，石英砂を少量入れて トロトロになるまでよくすりつぶす，それを遠心分離 機（2000回／分で2分）にかけ，その上澄み液を試験管 にとり，残滓液は別の時計皿にとっておく

　餌と糞も同様にして時計皿にとる。ただし餌の場合予め水に浸して柔かくしておくとよい。

（エ）ピューレツト反応

 　上澄み液2ｍｌを時計皿にとり，30％NaOH3滴加え ピューレツト試薬を5滴加えてタンパク質の有無を調 べる

《3》　結果と考察

 表1　消化管内容物のピューレット反応

	上澄み液の反応	残滓液の反応
餌	＋　　うす紫色	＋　　紫色
そ　の　う	＋　　うす青紫色	＋　　紫色
砂　の　う	＋−　ごくうす青紫色	＋−　ごくうす青紫色
小腸前端部	＋＋　紫色	＋＋　赤紫色
小腸中央部	−　　茶褐色	−　　青い褐色
小腸後端部	−　　だいだい色	−　　青色
直　　　腸	−　　緑色	−　　うす青色
糞	−　　うす青色	−　　うす青色

※　反応結果　＋−：ごくわずか反応，＋：反応あり， ＋＋：反応顕著，−：反応なし

 ※　生後25日の雛で，餌は配合飼料（成鶏用）

　表1から，タンパク質は小腸前端部まではあるが，小 腸中央部からなくなっていることがわかる。

（2）寒天平板法によるタンパク質分解酵素の確認

《1》　準　備 

○ヒヨコの各消化管　はさみ，ピンセット，スキムミ ルク，寒天末，円形ろ紙（パンチした直径6ｍｍのも の），シャーレ（直径9ｃｍ），上皿天びん，メスシリン ダー，ビーカー，湯せん鍋，ガラス棒，駒込ピペッ ト，電気定温器，加熱器具，ノギス，注射筒（50ｍｌ用）

○ボーキニンB（Pヒドロキシ安息香酸5g，70%ア ルコール95ml），0．9％生理食塩水

《2》　方　法

（ア）寒天平板の作りかた

　蒸留水100ｍｌにスキムミルク2ｇ，寒天末2ｇを加 え，湯せんで寒天がよく溶けたら，ボーキニンBを1ｍｌ 加えてよくかくはんして火を止め，予め乾熱滅菌し ておいたシャーレに，注射筒で10ｍｌずつ流しこむ。

（イ）内容物を取り出した各 消化管やすい臓を，防腐剤 の入った生理食塩水（0．99％ 生理食塩水1ｌにボーキニ ンB3ｍｌの割合）でよく洗 い3〜4ｍｍ四方の大きさに 切りとり，図1のようにパ ンチした円形ろ紙，この 組織片を寒天平板上に置 き，シャーレにふたをする。

図1

（ウ）38度に調整した電気定温器の中に静置し，20時間後観察する。 そして，無色透明部の直径を測定する。

《3》　結果と考察

写真1
20時間後
円形ろ紙をつけたままのもの	円形ろ紙をはがしたもの

 

　写真1のように，す い臓をのせた部分に， 直径12ｍｍ以上の大きな 無色円が形成される。 そのほか前胃には5ｍｍ 位の不透明なぽんやり した無色円が認められ る。時には，砂のうで も7ｍｍ位の不透明な無 色円が認められることがある。この結果すい臓にはタン パク質分解酵素があるといえる。また前胃からも出てい るのではないか。

（3）寒天平板無色部のアミノ酸の確認 

《1》　準　備 

○ろ紙（東洋ろ紙No．51　5ｍｍ×50ｍｍ）スプレー，ニン ヒドリン液（95％エタノール100ｍｌ，ニンヒドリン 0．1ｇ）電気定温乾燥器